[실험 정보] 전기영동에 대한 궁금증은 이걸로 종결시켜! Part 1

안녕하세요 뚜동이에요!

이때까지 PCR에 대한 내용을 알아봤는데 전기영동에 대한 이야기도 해드리려고 이렇게 글을 쓰게 되었어용

 

전기영동의 정의 부터 알아볼까요?

전기영동이란?

겔이라는 젤리같은 곳의 구멍에 DNA를 넣으면 전류를 통해 양전하쪽으로 이동하게 됩니다. 이때 DNA의 크기가 클수록 천천히 내려가게 돼요 그렇게 되면 이렇게 일정기간 내리면 크기에 따라 DNA가 나뉘게 되고 우리가 원하는 크기에 맞게 DNA가 보이는지에 따라 성공의 유무가 결정된다고 생각하시면 좋을 것 같아요

 

이렇게 설명으로는 잘 이해가 안가실 수 있으니 차근차근 하나씩 다시 설명해드릴게요!

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전기영동설명의 순서

전기영동의 설명 순서는 이렇게 구성해볼게요.

1. 전기영동기계의 구성은 어떻게 되어있는가?

2. 전기영동을 하기 위해 필요한 기구나 시약은 어떤게 있는가(피펫, TAE, TBE buffer loading dye, DNA Ladder등)

3. 전기영동을 위해 DNA를 겔에 넣을 때 주의해야할 점이나 꿀팁들!

4. 전기영동과정에서 주의사항!(너무 빨리 전류를 흐르게 하거나 하는경우)

5. 전기영동 후, 결과 해석하는 법(밴드의 크기 확인하는 법)

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1. 전기영동기계의 구성

바이오니아 사의 사진 사용

- Lid: 뚜껑입니다. 전기영동을 내릴 동안 닫아두어야 해요

- Comb: gel을 만들때 DNA를 넣을 공간을 만들어준다고 생각하면 될 것 같구 Comb의 크기가 넓고 작은 차이가 있어요

- Tank: tank에는 전류를 흐르게 하는데 필요한 용액을 넣어주는 통입니다.

- Dam: tray의 크기가 큰만큼 겔을 분리하기 쉽게 하기 위해 dam을 연결하기도 합니다. 

- Gel tray: Comb를 끼울 수 있도록 되어있구 gel을 이 위에 부어주면 됩니다.

- Gel Caster: Tray을 이 gel caster에 넣을 수 있는 통입니다. 

- power supply: 전극을 연결할 수 있도록 하는 전기 공급기계입니다.

 

이해가 잘 되지 않을 수 있지만 쭉 읽어보시면 좋을 것 같아요!

 

아래는 영동에 필요한 틀을 모두 연결한 상태입니다.

gel caster에 gel tray를 넣고, comb를 gel tray에 끼워 준비헤줍니다(필요에 따라 dam을 끼울지 선택)

자 그럼이제 tank에 조립한 틀을 넣으면 되겠죠? 그 후,  power supply를 끼워 전극을 연결해줍니다. 

 

이때, 전극을 연결해주는 과정에서 주의해야 할 점을 알려드릴게요

자, 제가 올린 PCR에 대한 원리설명 글에서도 나와있듯이, DNA는 아래의 뉴클레오타이드 중합체의 결합으로 이루어진 단위체에요

 

뉴클레오타이드

뉴클레오타이드를 자세히 보시면 인산염(Phosphate)쪽의 음이온 보이시죠! 저기 저부분때문에 DNA는 음이온을 가지고 있는 거랍니다.

 

그렇다면 우리는 저 전극을 어떻게 세팅해야 할까요!?

바로바로!!

DNA 넣는 쪽을 음극으로 내려가는 쪽을 양극으로 해서 작동을 시켜야 음에서 양으로 DNA가 이동하면서 밴드를 확인 할 수있게 된답니다. 아래의 그림처럼 음극에서 양극으로 DNA가 이동하게 된답니다.

자, PART1은 전기영동기계의 구성에 대해 알아봤어요

앞서 언급했던 순서대로 전기영동의 모든것을 계속 포스팅해볼게요 

실험에 대한 이해를 하는데 많은 사람들이 도움이 되었으면 좋겠습니다.

 

 

출처

https://www.bioneer.co.kr/20-a-7020-grp.html

https://ko.wikipedia.org/wiki/DNA

https://ko.wikipedia.org/wiki/%EC%A0%84%EA%B8%B0%EC%98%81%EB%8F%99